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服务流程:
1、联系我们,讨论服务内容
2、确定服务内容及服务时间
3、签定保密协议和业务合同
4、实施合同,定期向客户反馈
5、整理递交数据、结果和资料
6、完成合同,协商进一步合作

免疫沉淀服务(IP)

服务项目简介

在细胞生物学研究中,有些靶蛋白表达水平不高,难以用免疫印迹的方法检测到。为此可用te异性识别靶蛋白的抗体进行免疫沉淀

,纯化和富集靶抗原。免疫 沉淀可以从可溶性分子的复杂混合物中纯化te定的抗原,通常为蛋白质。免疫沉淀常用于测量蛋白质抗

原的相对分子质量,监控其翻译后修饰,研究蛋白质的半衰期 等。

技术步骤

①离心收集细胞,PBS洗涤2次。细胞用量根据目的蛋白表达的水平而定。

②按1×107细胞/mL加入细胞裂解液,于冰浴上超声破碎。

③4℃,12,000 g离心10 min,取上清。

④上清中加入50 μL 的蛋白A/G-agarose,于4 ℃在摇床上温和摇1-3 h,进行预清除。

⑤12,000 g离心30 s,取上清。

⑥将上清等分2份,补加稀释液至1 mL,其中一份加入1-10 μg识别目的蛋白的抗体,另一份加入等量的对照抗体,于4℃在摇床上

温和摇2 h,然后加入50 μL 的蛋白A/G-agarose,于4℃在摇床上温和摇过夜。

⑦离心弃上清,清洗沉淀4次。

⑧Western blot进行定性和定量检测。

应用实例

免疫沉淀服务(IP)

1.未免疫沉淀富集过的样品
2.抗体免疫沉淀富集过的样品

服务周期

我公司在接受实验委托2~3周内完成实验并交付实验报告。

客户须知

需提供te异性一抗及其来源说明。

 

 

 

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