文库构建服务

世联博研生命科学服务中心提供文库构建服务。世联博研生命科学服务中心提供的文库构建服务包括cDNA文库构建和基因组DNA文库构建，cDNA文库来源于

细胞表达出的RNA，反映基因组表达的基因序列信息，用于研究te定细胞中基因的表达状态和表达基因的功能等；基因组DNA文库来

源于基因组DNA，反映基因组的部信息，用于基因组物理图谱的构建，基因组序列分析，基因在染色体上的定位，基因组中基因的

结构和组织形式等。世联博研生命科学服务中心将会为您在文库构建服务方面提供方位，性价比高的解决方案。

收费标准

服务周期

实验周期一般为得到合格的Total RNA后30~45个工作日。如有te殊情况我们与客户及时联系反馈意见。

客户须知（对材料的要求、注意事项）

1. 客户须在实验开始前确保其提供材料的数量和质量，并提供相关信息。
2. 客户需提供尽量多的新鲜样品 （动物样品量大于5 g；植物样品量大于20 g；各种培养细胞提供5×107以上培养好的细胞)，样品4 ℃保存不超过一天，或将新鲜样品立即存于液氮或-80℃后保存不超过一个星期。
3. 可直接提供Total RNA或基因组DNA，要保证没有降解，要求总RNA＞500ug，浓度＞1ug/ul；mRNA＞3ug，浓度＞50ng/ul；OD260/OD280值≥1.8，以我公司电泳胶图、紫外分析仪定量检测为准。
4. 建议由我方提取RNA或基因组DNA；如果客户提供RNA样品或基因组DNA，由样品质量产生的任何问题，其损失和责任应由样品提供方承担。

服务程序

1. 可在我公司网站内直接填写《文库构建服务订单》发至我公司邮箱。

2. 可下载订单，填写完成后，用传真的形式发到我公司。

3. 可电话联系详谈有关具体要求和服务内容。

4. 签订《文库构建服务合同》，预付实验总费用的50%作为实验预付款。

5. 寄送：委托单位的试验材料和试剂等均须采用te快专递形式邮寄，有低温要求的、固定要求的，按低温保存、固定防碎方法运输

，以确保实验物品的安可靠。

6. 实验结束后，本公司将结果及时发给客户，同时根据客户要求处理相关材料：

产物电泳图谱；
cDNA初始库/基因组DNA文库，保存在-20 ℃；
文库评价数据，包括库容量，插入片段平均长度，重组效率，cDNA完整性评价等；
实验报告（包括实验流程，材料和方法等）。

7. 客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务咨询及技术支持

电话:

服务项目简介

1. 普通cDNA文库（质粒文库、噬菌体文库）构建

用Oligo(dT)或随机引物作逆转录引物，将合成的cDNA连接到适当的载体中获得cDNA文库。

（1）Total RNA的提取和mRNA的纯化。

（2）cDNA条链的合成。

（3）cDNA弟二条链的合成。

（4）双链cDNA的修饰。探针标记技术：标记物有放射性和非放射性两种。非放射性：生物素、地高辛素、荧光素 标记方法:切口平

移法、随机引物法、末端标记法、单链DNA探针标记、寡核苷酸探针标记法。

（5）双链cDNA的分子克隆。

（6）cDNA文库的扩增。

（7）cDNA文库鉴定评价。

2. 均一化文库构建

均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施，有利于研究基因的表达和序列分析。我们

基于双链te异性核酸酶（Duplex-Specific Nuclease， DSN）的cDNA文库均一化技术构建均一化cDNA文库，能减低高丰度表

达基因100倍以上，有效富集低丰度表达基因。

文库特点：无需反复杂交过程，均一化程度高；均一化后平均插入片断大小无明显变化。

3. 长文库构建

利用公司专有技术，进行长文库构建服务。尤其适合希望获得高比例长基因的客户。 文库特点：不经过PCR过程，容易获得低

丰度基因;长比例高（长比例>80%）；样品用量大，需要25 mg的mRNA，因此，不适合样品量少的材料。

4. 基因组DNA文库构建

公司具备构建以 puc 19 作为载体的基因组散弹法文库的成熟技术，拥有超声仪、电转仪等配套仪器、有秀的专业技术人员，

可以为您提供从总 DNA 提取、随机剪切、载体连接、转化、扩增到保存的程服务。同时，还可以为您作进一步的数据处理及信息

分析。

技术原理

cDNA文库是在te定的组织或细胞中，以mRNA为模板逆转录形成的互补DNA（cDNA）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后

转化受体菌形成重组DNA克隆群，这样包含着细胞部mRNA信息去除了内含子的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库，具有

组织或细胞te异性。

从YAC(yeast artificial chromosome)库，或从BAC(bacterial artificial chromosome)库、PAC(P1 artificial

chromosome)库中筛选相对应的克隆。YAC库的嵌合性严重且操作难度较大，已逐步为PAC库和BAC库取代。PAC系统是以噬菌体P1为

基础的克隆系统，它可容纳70～100 kb的插入片段，并可选择性地区分重组子和非重组子，且同时有两套复制机制。单拷贝复制子

可用于稳定克隆增殖，而多拷贝复制子则可在Lac操纵子的控制下用于DNA的制备。BAC系统是基于大肠杆菌中可大容量容纳基因且稳

定性良好的F因子衍生而来的载体系统，可容纳超过100 kb的插入片段，BAC克隆的插入片段的平均长度为120 kb，大可达到240

kb左右。良好的稳定性和操作的简便性是BAC系统的主要you点。由这些克隆入手，采用依赖于适当cDNA文库的方法、依赖于特征序列

的方法或依赖于表达性质等方法获得候选cDNA。

基因组文库是含有某种生物体部基因的随机片段的重组DNA克隆群体。反应基因组的部信息，用于基因组物理图谱的构建，基因

组序列分析，基因在染色体上的定位，基因组中基因的结构和组织形式等。我公司利用基因组散弹法文库的成熟技术，构建基因组

文库，并保证库容量和重组率。

应用领域

① 基因分离研究

② 个体发育研究

FAQ

各种文库构建的价格差得比较多，均一化cDNA文库构建是什么技术？主要是用来做什么的？

我们基于双链te异性核酸酶（Duplex-Specific Nuclease，DSN）的方法来构建均一化cDNA文库，能减低高丰度表达基因100倍以

上，有效富集低丰度表达基因。均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施，有利于研

究基因的表达和序列分析。

各种文库构建的载体分别是何种载体？

cDNA文库构建使用的载体很广泛，除常用质粒和λ噬菌体载体外,我公司也可以使用客户要求或提供的载体构建所需cDNA文库。

构建文库有没有质量标准？

cDNA文库质量的评价主要有两个方面，一个是文库的代表性，也就是指包含的重组cDNA反应来源细胞中表达信息的完整性；另一个

是文库的库容量，它是指构建的原始cDNA文库中所包含的立的重组子克隆数。