蛋白质原核表达技术服务

蛋白质原核表达技术服务

世联博研生命科学服务中心提供高质量的原核蛋白表达服务。世联博研生命科学服务中心已建立整套的基因克隆与表达体系，无论是单个基因的克隆、表达与纯化，还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化，均能选用适合您试验（科研项目）需要的表达系统和合适的表达载体为您提供you质的服务。

收费标准及服务周期

2500元/1mg，10mg以内每增加1mg加入1000元成本费。2-4周（带标签）

3500元/1mg，10mg以内每增加1mg加入1500元成本费。4-6周（不带标签）

服务内容

1.客户可提供必要的资料及以下任意一种方式：

⑵提供经测序验证的目的PCR产物或模板，由我们为您克隆在相应的载体上（基因克隆费用另计）；

⑶提供相关资料及核酸／蛋白序列，由我们利用生物信息学的方法进行分析处理后提出具体可行的实验方案并付诸实现（基因合成及亚克隆费用另计）。

2.目的基因亚克隆：我们可以提供多种原核表达载体，以满足不同的实验要求。我们提供构建好的质粒、（相应的）菌株及测序报告。（参见原核表达载体构建服务）

3.我们还可以应客户的要求进行原核表达蛋白的大量表达与纯化。

服务程序

1.可在我公司网站内直接填写《蛋白质原核表达服务订单》发至我公司邮箱。

2.可下载订单，填写完成后，用传真的形式发到我公司。

3.可电话联系详谈有关具体要求和服务内容。

4.签订《蛋白质原核表达服务合同》，预付实验总费用的50%作为实验预付款。

5.寄送：委托单位的试验材料和试剂等均须采用te快专递形式邮寄，有低温要求的、固定要求的，按低温保存、固定防碎方法运输，以确保实验物品的安可靠。

6.实验结束后，本公司将结果及时发给客户，同时根据客户要求处理相关材料：

b、Western blot检测结果

c、you化的蛋白纯化条件

d、纯化蛋白

e、实验流程及结果

7.客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务咨询及技术支持

电话:

Email:slby800@163.com

实验原理

1、E . coli表达系统

E . coli是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli菌株以后，通过温度的控制，诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质，将表达样品进行SDS-PAGE以检测表达蛋白质。
2、外源基因的诱导表达
提高外源基因表达水平的基本手段之一，就是将宿主菌的生长与外源基因的表达分成两个阶段，以减轻宿主菌的负荷。常用的有温度诱导和药物诱导。本实验采用异丙基硫代-β-D-半乳糖昔（IPTG）诱导外源基因表达。不同的表达质粒表达方法并不完相同，因启动子不同，诱导表达要根据具体情况而定。

实验流程

大肠杆菌和酵母蛋白表达系统

FAQ（Frequently Asked Questions）

1.大肠杆菌蛋白表达实验中需要注意的事项？

（1）ALL操作尽量在冰上操作，以避免蛋白质发生变性；

（2）根据自己的需要选择不同的表达载体，并注意不同的表达载体上的融合标签和携带的抗性基因，其中有些标签是可以去除的。

（3）构建好的载体好进行测序验证，保证读码框正确，即没有移码。

（4）长期保存的pET重组子在高浓度甘油中会导致质粒不稳定。

（5）37 ℃生长常常会使一些蛋白累积形成包涵体，而30 ℃生长则可能产生可溶的和有活性的蛋白。在某些情况下，低温（15－20℃）延长诱导时间可以使溶解性蛋白的产量达到大。

（6）进行SDS-PAGE分析时，需you化电泳上样体积。

2.我需要表达某蛋白，用于制备多（单）克隆抗体的制备，是采用真核表达还是原核表达好？

采用原核表达就够了。