RNA干扰服务(RNAi)-RNA干扰载体构建

RNA干扰服务（RNAi）

世联博研生命科学服务中心提供RNA干扰服务（RNAi）。RNA干扰（RNA interfering）现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列te异性基因转录后的沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性，可以te异地将te定的基因沉默，从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学，药物靶点筛选，细胞新华传导通路分析，疾病治疗等。

服务内容

RNAi服务包括以下两个方面：

（1）化学合成RNAi服务

①RNAi双链设计：客户需要与我们共同讨论实验方案，并提供靶基因的名称、序列或GeneBank ID等

②siRNA合成

③根据客户要求可进一步转染哺乳动物细胞 ④检测抑制效果：荧光定量PCR检测mRNA表达情况、Western Blot检测蛋白表达情况 ⑤提供实验报告：siRNA序列、构建载体的测序报告；荧光定量PCR检测报告、Western Blot图片等

（2）载体介导的RNAi服务

①shRNA设计：客户需要与我们共同讨论实验方案，并提供靶基因名称、序列或GeneBank ID等

②shRNA构建

③shRNA载体的选择，提供pGPU6/GFP/Neo、pGPH1/GFP/Neo等多种载体

④根据客户要求可进一步转染哺乳动物细胞 ⑤检测抑制效果：荧光定量PCR检测mRNA表达情况、Western Blot检测蛋白表达情况

⑥提供实验报告：shRNA序列、构建载体的测序报告；荧光定量PCR检测报告、Western Blot图片等

收费标准

服务周期

一般为4周左右，具体视实验情况而定。

客户须知（对材料的要求、注意事项）

客户需要提供RNA干扰的目的基因的名称、序列或Gene Bank号，并与我们共同讨论实验方案。

服务程序

1. 可在我公司网站内直接填写《RNA干扰服务订单》发至我公司邮箱。

2. 可下载订单，填写完成后，用传真的形式发到我公司。

3. 可电话联系详谈有关具体要求和服务内容。

4. 签订《RNA干扰服务合同》，预付实验总费用的50%作为实验预付款。

5. 寄送：委托单位的试验材料和试剂等均须采用te快专递形式邮寄，有低温要求的、固定要求的，按低温保存、固定防碎方法运输，以确保实验物品的安可靠。

6. 实验结束后，本公司将结果及时发给客户，同时根据客户要求处理相关材料：

siRNA/shRNA序列；

构建的载体以及测序报告；

荧光定量PCR检测报告/Western blot检测报告等；

具体实验方法、步骤、所用试剂、仪器，及相关分析数据等，实验结果将以电子或书面形式提交给您。

7. 客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务项目简介

RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)诱发的、同源mRNA高效te异性降解的现象。RNAi的作用提供了一种经济、快捷、高效的抑制te异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。可用于功能基因组学、基因治疗、药物靶标筛选、细胞信号传导通路分析、蛋白质相互作用等研究。世联博研生命科学服务中心RNAi服务团队拥有专业的技术服务，能够帮助客户大化实现RNAi技术应有的价值，避免一些实验错误。我们的研究队伍将和您一起设计更加广泛有效的RNAi解决方案。

应用领域

① 基因功能的研究

② 疾病的基因治疗

③ 蛋白质功能的研究

FAQ:

公司每个基因敲除共设计几个干扰siRNA/shRNA？

3个

敲除服务结束后，公司是否提供构建好的，能成功敲除的siRNA或者shRNA克隆？

提供

是否保证敲除成功，不成功不收费？

我们保证实验不成功不收费

RNAi干扰服务中，干扰的效率一般有多少？

干扰的效率一般能达到70%

我们需要提供什么信息用于siRNA的合成？你们可以帮助免费设计吗？我们可以为您免费设计并合成siRNA

你们提供的siRNA是怎样装运的？如果在常温下放置了一个星期，还有效吗？我们提供的siRNA为干粉，可以常温运输，但要注意不能受RNA酶降解

使用RT-PCR检测基因knockdown结果，之前应该注意哪些问题？

要注意以下几点问题：

1、我们RT-PCR的引物应该设计在target位置的两侧，而不是同侧。目前已经知道的siRNA介导的基因knockdown机制是RSIC先介导靶mRNA的切割，切割导致靶mRNA的降解，由于切割和降解可能具有不同的时间点，因此，设计于同侧的PCR引物可能导致假阴性结果或knockdown效率的低估。

2、另外，RT-PCR结果会因为靶基因mRNA降解时间不同、细胞内靶基因mRNA丰度不同而导致假阴性结果，te别对于丰度较高的基因，使用的检测方式包括定量PCR、Northern检测、western检测等。这些方法会更加真实的反映RNAi的结果。