细胞增殖检测服务

应用领域

MTT比色法能定量检测细胞的增殖与生长。已经在生物学和医学的许多研究领域中用于检测细胞毒性、细胞活性和细胞增殖试验。

收费标准

服务周期

我公司在正式接受实验委托5~6周左右完成实验并交付实验结果。

客户须知（对材料的要求、注意事项）

1.客户须在实验开始前确保其提供材料的数量和质量，并提供相关信息：

样本的介绍；

相关实验设计内容如药物处理时间、样本浓度等。

2.本公司在收到客户提供的研究材料后的弟二个工作日起开始实验。

服务程序

1.可在我公司网站内直接填写《细胞增殖检测服务订单》发至我公司邮箱。

2.可下载订单，填写完成后，用传真的形式发到我公司。

3.可电话联系详谈有关具体要求和服务内容。

4.签订《细胞增殖检测服务合同》，预付实验总费用的50%作为实验预付款。

5.寄送：委托单位的试验材料和试剂等均须采用te快专递形式邮寄，有低温要求的、固定要求的，按低温保存、固定防碎方法运输，以确保实验物品的安可靠。

6.实验结束后，本公司将结果及时发给客户，同时根据客户要求处理相关材料：

原始数据；

实验报告（包括实验流程，材料和方法等）。

7.客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务咨询及技术支持

电话:

Email:SLBY800@163.COM

服务项目简介

MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan，并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的Formazan，用酶联免疫检测仪在一定波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。

技术步骤

1.接种细胞：收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000~10000孔，边缘孔用无菌PBS填充。

2.细胞培养：5% CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）。

3.药物处理：加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药.一般5~7个梯度，每孔100ul，设3~5个复孔。

4.呈色：5% CO2，37℃孵育16~48小时，倒置显微镜下观察。每孔加入20ul MTT溶液（5mg/ml，即0.5% MTT），继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2~3遍后，再加入含MTT的培养液。

5.溶解：终止培养，小心吸去孔内培养液。对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加入150ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。

6.比色：在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制细胞生长曲线。同时设置调零孔（培养基、MTT、二甲基亚砜），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜）。

应用实例

FAQ（Frequently Asked Questions）

1. 药品的详细信息可以保密吗？

可以，只需要提供给我们药物的分子量等必需信息。

2. 网站上的价格：4000元/样品，指的是每用一种药物处理5株细胞的价格，还是每用一种药物处理1株的价格？

指的是每用一种药物处理5株细胞的价格,详细情况请来电咨询。

3. 贵公司的细胞增殖检测服务只能用MTT法检测吗？能否用其他检测方法？

用MTT法，也可以用其他方法，价钱另计。

4. 药物检测时，每种细胞株的一般采用几个平行？对照又是怎么处理的，以及相应采用几个平行？

药物实验每个浓度一般做3个平行，对照也保证有一定的复孔数。