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酶联免疫(ELISA)服务 世联博研生命科学服务中心提供酶联免疫(ELISA)服务。ELISA是继免疫荧光和放射免疫之后又一具有重大意义和深远影响的免疫技术。该技术利用蛋 白和聚苯乙烯表面疏水吸附的特性,将抗原-抗体te异性反应固定于固相载体表面进行,同时结合酶对底物的高效催化作用产生高灵 敏度的实验技术。由于酶的高效生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十或几百个底物分子发生反应,产生了放大效应 ,使得原来微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被检测出来,因此可成功应用于标本中微量物质含量的测定。 客户须知(对材料的要求、注意事项) 1.液态类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等); 2.样本量:每个样本收集体积=120ul*检测指标数; 3.样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存; 4.请提前告诉我们:您样本的种属(人、大鼠、小鼠、兔、猪等)、样本数量、待测指标。 在收集标本前必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。 服务周期 1~2周左右,视样本量而定。 收费标准 组织样本蛋白提取定量80元/ 样;300元/单次检测 公司可代购客户所需要的ELISA试剂盒,费用另计,也可由客户自行提供,请来电详询。 服务程序 1.可在我公司网站内直接填写《酶联免疫(ELISA)服务订单》发至我公司邮箱。 2.可下载订单,填写完成后,用传真的形式发到我公司。 3.可电话联系详谈有关具体要求和服务内容。 4.签订《酶联免疫(ELISA)服务合同》,预付实验总费用的50%作为实验预付款。 5.寄送:委托单位的试验材料和试剂等均须采用te快专递形式邮寄,有低温要求的、固定要求的,按低温保存、固定防碎方法运输,以确保实验物品的安可靠。 6.实验结束后,本公司将以下结果及时发给客户,同时根据客户要求处理相关材料: ·实验方法、步骤、所用试剂、仪器等。 ·实验结果将以电子或书面形式提交给您。 服务咨询及技术支持 ·电话: ·Email:slby800@163.com 服务项目简介 ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗 原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶 的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起 反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物 质分开。 再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反 应的底物后,底物被酶催化 成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测 定方法达到很高的敏感度。 技术步骤 双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,以此为例,总体操作步骤如下: 1)将te异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。 应用领域 适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。 FAQ(Frequently Asked Questions) 1. 可用作ELISA实验的标本有哪些? 可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。 2. ELISA实验中加样有哪些需要注意的地方? 在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并 注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染, 也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在 板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1 min以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定 量多道加液器,使加液过程迅速完成。
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