免疫沉淀服务(IP)

服务项目简介

在细胞生物学研究中，有些靶蛋白表达水平不高，难以用免疫印迹的方法检测到。为此可用te异性识别靶蛋白的抗体进行免疫沉淀

，纯化和富集靶抗原。免疫沉淀可以从可溶性分子的复杂混合物中纯化te定的抗原，通常为蛋白质。免疫沉淀常用于测量蛋白质抗

原的相对分子质量，监控其翻译后修饰，研究蛋白质的半衰期等。

技术步骤

①离心收集细胞，PBS洗涤2次。细胞用量根据目的蛋白表达的水平而定。

②按1×107细胞/mL加入细胞裂解液，于冰浴上超声破碎。

③4℃，12,000 g离心10 min，取上清。

④上清中加入50 μL 的蛋白A/G-agarose,于4 ℃在摇床上温和摇1-3 h，进行预清除。

⑤12,000 g离心30 s，取上清。

⑥将上清等分2份，补加稀释液至1 mL，其中一份加入1-10 μg识别目的蛋白的抗体，另一份加入等量的对照抗体，于4℃在摇床上

温和摇2 h，然后加入50 μL 的蛋白A/G-agarose,于4℃在摇床上温和摇过夜。

⑦离心弃上清，清洗沉淀4次。

⑧Western blot进行定性和定量检测。

应用实例

1．未免疫沉淀富集过的样品
2．抗体免疫沉淀富集过的样品

服务周期

我公司在接受实验委托2~3周内完成实验并交付实验报告。

客户须知

需提供te异性一抗及其来源说明。