蛋白激酶活性实时检测分析系统

为了研究生物系统中的激酶，我们已经开发了一种du特的方法，使用具有代表已知磷酸位的肽的高灵敏度微阵列。在实验过程中，将阵列与细胞或组织的裂解液一起孵育。样品中的活性激酶会磷酸化其在阵列上的靶标。识别磷酸化残基的通用荧光标记抗体用于可视化磷酸化。智能分析工具可用于解释磷酸化模式，并生成关于条件之间激酶活性差异的假设。

蛋白激酶活性实时检测分析系统由pamchip和pamstation两部分组成，pamchip是微阵列芯片，每个pamchip有4个试验点，每个试验点有96个微阵列。pamstation是自动化分析pamchip的分析平台，可以同时分析3个pamchip。

激酶是研究zui深入的蛋白质靶标，也是众多靶向疗法的基础。但是，传统方法研究的是蛋白质的丰度而不是其活性。这导致了关于细胞信号传导真正工作方式的知识鸿沟，并且仅对临床样品有部分了解。

蛋白激酶活性实时检测分析系统目前是世界上wei依一个能做到实时检测激酶活性，进而分析信号通路、生物标记物发现、疾病模型表征、药物靶点发现和反应的设备。

产品应用
● 途径阐明
● 生物标志物发现
● 疾病模型表征
● 靶点发现与相互作用

我们的技术为您的研究带来的好处：

● 广泛的覆盖范围– 380种磷酸用于覆盖激酶组的大部分。

● 基于激酶活性– 可以测量对激酶的直接抑制剂作用。

● 灵敏– 仅需要少量蛋白质输入（每个阵列0.5至5μg），因此使该测定比其他方法更为灵敏。

● wu特异性抗体– 数据质量不依赖于磷酸抗体的特异性，因为特异性源自380个磷酸位点。

● quan长激酶– 我们可以从几种细胞系和组织的裂解物中测量quan长蛋白的激酶活性，而其他基于重组的激酶活性测定法则wu法提供这种活性。

荷兰PamGene公司为quan面的激酶活性分析平台可为广泛的应用提供新的机会，这些应用可洞察疾病的分子机制并导致发现生物标志物。PamGene的许多应用都在肿瘤学领域，而在神经生物学、心血管生物学和免疫学等其他疾病领域也出现了新的应用。

PamGene使用专有的3D肽微阵列技术（ PamChip®和PamStation®），该技术为quan局激酶活性分析提供了多种方法。该测定非常灵敏，仅需少量裂解液即可测量各种样品（包括细胞系，异种移植物和人体组织）中激酶的活性。从几千个细胞中获得的裂解物足以获得这些样品中存在的多种激酶的动力学特征。这是通过将样品裂解物与固定在微阵列3D表面上的144个酪氨酸或144个丝氨酸/苏氨酸激酶肽底物一起孵育来实现的。裂解物中存在的激酶会磷酸化肽底物，可使用荧光标记的抗体检测到。

实验室工作流程：

激酶测定工作流程（图3a-c）包括3个步骤：（ 1）样品制备（细胞或组织裂解）；（ 2）使用我们专有的Evolve软件进行PamChip®检测；（ 3）使用我们专有的BioNavigator软件进行数据分析和知识整合。在测定过程中，样品溶液被泵送通过多孔膜，从而实现更快的动力学和实时测量。当溶液在阵列下方时，工作站中的CCD相机会在几个曝光时间拍摄每个阵列的图像（图3d）。图像随后由BioNavigator®软件使用，以生成每种肽的动力学数据曲线（图3c）。使用BioNavigator®软件执行的数据工作流程包括图像量化，质量控制，统计分析，可视化和解释。

该产品du有的特色：

1、广泛的覆盖范围– 380种磷酸用于覆盖激酶组的大部分。2、基于激酶活性– 可以测量对激酶的直接抑制剂作用。

3、灵敏– 仅需要少量蛋白质输入（每个阵列0.5至5μ g），因此使该测定比其他方法更为灵敏。4、wu特异性抗体– 数据质量不依赖于磷酸抗体的特异性，因为特异性源自380个磷酸位点。

5、quan长激酶– 我们可以从几种细胞系和组织的裂解物中测量quan长蛋白的激酶活性，而其他基于重组的激酶活性测定法则wu法提供这种活性。