RT-PCR服务，逆转录PCR技术服务

逆转录PCR技术服务

世联博研生命科学服务中心为客户提供you质的逆转录PCR技术服务。

逆转录PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。逆转录PCR广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种RNA的含量。

逆转录PCR的关键步骤在是RNA的反转录，要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。RT-PCR有时候也会指代实时PCR(real-time PCR)。为了与逆转录PCR相区别，通常被写作“定量PCR”(quantitative PCR，QT-PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)。

收费标准

1.当标本个数>5个时，收费标准为每个标本每个指标80元，内参免费；

2.当标本个数≤5个时，收费标准按照5个标本计算；计算方法如上；

3.标本大于50个以上并且指标较多时，收费标准可另行商议。

A.RNA抽提(总RNA提取)：20份以下每份样品80元，超过20份每份60元，低收费1200元。

B.RT-PCR:20份以下每份样品80元，超过20份每份60元，低收费1200元。

C.PCR:20份以下每份样品50元，超过20份每份35元，低收费1000元。

服务周期

1~2周，根据样品情况而定。

客户须知（对材料的要求、注意事项）

1.客户须在实验开始前确保其提供材料的数量和质量，并提供相关信息。

A.客户需提供尽量多的新鲜样品（组织：100-200 mg或直接提供纯化好的总RNA 5 μg/样本）。动物组织离体后必须立即用生理盐水清洗，时间不超过10min，马上用一次性塑料手套或铝箔包好冻入液氮中，-70℃低温冰箱保存；植物组织必须保证新鲜，用液氮速冻后放入-70℃低温冰箱保存；细胞为培养瓶培养。同时请避免样品储存时间过长，有融化或者溶解。

B.可直接提供Total RNA，要保证没有降解，要求总RNA＞500μg，浓度＞1μg/μl；mRNA＞3 μg，浓度＞50 ng/μl；OD260/OD280值≥1.8，以我公司电泳胶图、紫外分析仪定量检测为准。引物长度及G、C含量，引物若为干粉，请提供引物的准确量；若为稀释液，请提供引物的终浓度（每个反应所需的引物满足以下要求：浓度≥10pm/ml，体积≥10ml）。（引物也可由我公司提供，费用另计。）

C.建议由我方提取RNA；如果客户提供RNA样品，由样品质量产生的任何问题，其损失和责任应由样品提供方承担。

2.本公司在收到客户提供的研究材料后的弟二个工作日起开始实验。

3.实验结束后，本公司将结果及时发给客户：

A.cDNA

B. PCR产物

C.实验报告（包括实验方法、照片等）。

服务程序

1.可在我公司网站内直接填写《RT-PCR服务订单》发至我公司邮箱。

2.可下载订单，填写完成后，用传真的形式发到我公司。

3.可电话联系详谈有关具体要求和服务内容。

4.签订《RT-PCR服务合同》，预付实验总费用的50%作为实验预付款。

5.寄送：委托单位的试验材料和试剂等均须采用te快专递形式邮寄，有低温要求的、固定要求的，按低温保存、固定防碎方法运输，以确保实验物品的安可靠。

6.实验结束后，本公司将结果及时发给客户，同时根据客户要求处理相关材料。

7.客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务咨询及技术支持

·电话:

·Email:SLBY800@163.COM

服务项目简介

逆转录聚合酶链式反应的原理：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采取Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，从而获得目的基因或检测基因表达。该技术通过循环扩增，提高了其检测的灵敏度。主要用于分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统等。

技术步骤

应用实例

FAQ（Frequently Asked Questions）

1. 逆转录PCR可以用于定量检测基因的表达水平吗？如果可以，如何检测分析？

逆转录PCR可以用于半定量检测基因的表达水平，半定量逆转录PCR是一种简捷、快速、te异的定量RNA 测定方法, 通过mRNA 反转录成cDNA , 再进行PCR 扩增, 扩增产物以指数形式增长, 通过测定PCR 产物的数量, 就可以推测各样品中te异mRNA 的相对含量。逆转录PCR服务可以用于基因调取吗？

在进行目的蛋白的表达、构建表达载体等实验时，通常需要获得一段目的基因。我们可以根据您提供的已知参考序列（NCBI上已发表)，以基因组DNA或总RNA为模板，获取您所需要的某个区域的一段基因。

2. 怎样对合成DNA/RNA制品进行定量

由于核酸在260 nm附近有强吸收，因此常根据此性质，用紫外分光光度计测定核酸溶液在260 nm的吸光度值，据此对核酸进行定量，用OD值来表示。