人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，HUCMSC)是一种能够自我更新、生长速率较快、多能分化的成体干细胞，HUCMSC比其他成体干细胞，更具有其优势特点，更加原始，再生性与适应性更好，HUCMSC含有外泌体量更多，因此，被认为是研究外泌体的最佳来源。

为了探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，HUCMSC)源外泌体对氧糖剥夺复氧人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)凋亡的抑制作用，阐明其可能的机制，中国人民武装警察部队脑创伤与神经疾病研究所叶益超等培养HUCMSC，将收集的细胞上清液使用超速离心法提取HUCMSC分泌的外泌体(HUCMSC-exosomes，HUCMSC-EXO)并对其进行鉴定，将HUVEC随机分为正常对照组、模型组(氧糖剥夺/复氧组)和分别添加不同浓度的HUCMSC-EXO(20 μg/ml、40 μg/ml、60 μg/ml)处理组(在模型组的基础上加入HUCMSC-EXO)。倒置相差显微镜形态学观察各组HUVEC细胞的表观变化，使用CCK8试剂测算各组HUVEC增殖抑制率，Western blot检测相关凋亡蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达水平。另设模型组、HUCMSC-EXO＋模型组、抑制剂＋模型组和HUCMSC-EXO＋抑制剂＋模型组，Western blot观察HUCMSC-EXO、抑制剂及两者共用对HUVEC细胞HIF-1α及Bax的表达水平的影响。

结果发现，成功提取和鉴定HUCMSC-EXO，在倒置相差显微镜下，与正常对照组比较，模型组和不同浓度HUCMSC-EXO处理组的HUVEC体积缩小，变圆，连接疏散，生长状态较差；CCK8检测，HUCMSC-EXO处理组较模型组的细胞活力显着上升，差异有统计学意义(t＝9.23，P<0.05)，并与剂量呈正相关。Western blot检测，与对照组比较，模型组HUVEC的Caspase-3[(0.296±0.038)，(0.879±0.088)；t＝14.92，P<0.05]、Bax[(0.234±0.034)，(0.762±0.084)；t＝14.36，P<0.05]表达水平上调，Bcl-2的表达水平下调[(0.863±0.103)，(0.387±0.059)；t＝9.85，P<0.05]，均差异有统计学意义；与模型组比较，HUCMSC-EXO处理组HUVEC的Caspase-3(0.586±0.075)、Bax(0.311±0.055)水平下调(t＝6.24，11.01，均P<0.05)，Bcl-2(0.665±0.071)水平上调，均差异有统计学意义(t＝7.45，P<0.05)。抑制剂干预实验显示，与HUCMSC-EXO＋抑制剂＋模型组比较，抑制剂＋模型组HIF-1α蛋白[(0.348±0.055)，(0.388±0.077)；t＝1.04，P>0.05]和Bax蛋白[(0.363±0.069)，(0.370±0.064)；t＝0.18，P>0.05]表达差异无统计学意义(均P>0.05)，但均较模型组[HIF-1α蛋白(0.919±0.064)，Bax蛋白(0.902±0.071)]明显下调，差异有统计学意义(t＝13.03，13.56，均P<0.05)。

这个研究表明，HUCMSC-EXO对HUVEC的氧糖剥夺/复氧模型具有保护作用，其机制可能与下调HIF-1α有关。(生物谷Bioon.com）

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