产品名称:FLECS高通量单细胞力生物学和筛选装置设备系统 |
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FLECS的平台微技术,该技术可以同时从 1000 个图案均匀的单细胞中获取稳健的收缩性数据,并与 96 孔板和 384 孔板格式无缝集成,以促进大规模药物筛选。 对活力没有不利影响,确保了对细胞形态的统一控制,并且细胞力的应用方向相同,从而允许在所有细胞之间进行直接比较。此外,这些微图案的形状经过战略性设计,以集中细胞力,使其可以通过简单的标量测量来表征,而不是随机分布的细胞所需的更复杂的力场测量。 图 1 中所示的“X”模式引导相邻端子之间的应力纤维形成,并沿两个垂直轴集中累积力,导致沿这些轴向微模式中心发生可预测的一维位移。这些微模式的后续成像,而不是细胞本身的成像,会产生简单的基于图像的数据,这些数据可以通过使用简单且高度并行化的算法进行处理。重要的是,这些测量是自我控制的,因为将细胞占据的微图案尺寸与相同图像中存在的一组未占用的微图案进行比较,因此无需删除细胞即可获得参考测量值。此外,由于该系统中所有细胞的位置和足迹都是已知的,因此可以使用活细胞探针来区分化合物的抑制作用和每个单个细胞的任何潜在化合物毒性。 将荧光和粘附微图案的阵列共价嵌入到具有受控弹性的软基材中。单个细胞粘附、扩散并终对这些微细胞施加收缩力,产生可观察的位移,用于立推断每个粘附细胞的相对力产生。 来自接种的 FLECS 板的单个 384 孔板的图像将进行初级 HASM。(A) 以 4 × 放大倍率捕获的整个 384 孔板。直接嵌入井底弹性体中的微图案阵列由单个 HASM 单元粘附和收缩。每个孔中存在 1,200 多种微模式。(B) 在 10 ×拍摄的 (A) 放大,以获得更多细节。相对于位于左上角和中右的未占据的微图案,细胞粘附的微图案向内移动,它们提供了有关这些细胞收缩能力的信息。虽然 (B) 中的图像是使用 10 × 放大倍率捕获的,但 4 × 放大倍率足以解决收缩激动剂对细胞的影响。将细胞固定在收缩状态,透化,并进行 F-肌动蛋白染色以进行可视化。(C) 选定电池的放大。相邻末端之间的肌动蛋白亮带说明了力产生的方向,特别是由“X”形决定的。白色箭头表示净力施加和微模式位移的方向。HASM,人体气道平滑肌。 |